叶下珠,傣文名“牙海巴”,为大戟科叶下珠属植物,全草,傣医常用于治疗肝炎、赤白痢等。中医药典籍也认为,叶下珠味甘苦、凉,入肝肺二经,有平肝清热、利水解毒、消疳止痢的功能。根据傣医应用叶下珠治疗肝炎的经验,用叶珠提取物研制开发了具有良好保肝作用的民族药制剂肝保宁胶囊。
本文由昆明市生物技术工程研究中心与昆明市中医医院相关人员联合撰写,现将有关药效学研究结果报告如下:
1 材料与仪器
1.1 材料
药材:叶下珠,采于西双版纳,经中科院昆明植物研究所李恒研究员鉴定为大戟科叶下珠属植物叶下珠Phyllanthus urinaria Linn.。联苯双脂:北京协和制药厂(批号940509)。D--半乳糖(D-Gal):重庆医学院(批号:(940908)。四氯化碳(CCI4):华西医科大学(批号:941103)。氢化可的松:上海第九制药厂(批号:871102)。
试剂:乙醇、醋酸乙脂等均为市售。
动物:昆明种小鼠,18~22g,云南省药品检验所繁育室提供。SR小鼠,22 2g,同批实验中性别一致,四川抗菌素研究所提供。
1.2 仪器:
真空旋转蒸发器(BUCH117),全自动系列化分析仪(岛津CL--7000),分光光度计(721型)。
2 方法
2.1 制备
叶下珠干燥全草,洗净,粉碎,用80%乙醇冷浸提取5次,合并提取液,用真空旋转蒸发器低温浓缩,浓缩液用水沉法除杂,浓缩后低温干燥。
2.2 药效学实验研究
2.2.1 对CCI4引起的实验性肝损伤的影响
SR小鼠60只,雌性,随机分为6组,每组10只,除正常对照组,各组腹腔注射CCI4140mg/kg,随后实验组予叶下珠干浸膏46mg/kg.d、140mg/kg.d、460mg/kg.d ;阳性对照组予联苯双脂 200mg/kg.d;模型对照组和正常对照均给予同体积蒸馏水,连续灌胃给药5天,于最末一次给药后15小时,断头处死动物,取血测定SGPT,同时取肝脏进行病理组织检查。
2.2.2 对D-Gal引起的实验性肝损伤的影响
SR小鼠60只,雌性,随机分为6组,每组10只,实验组予叶下珠干浸膏46mg/kg、140mg/kg、460mg/kg;阳性对照组予联苯双脂 200mg/kg;模型对照组和正常组均给予同体积蒸馏水,于12小时内各灌胃给药3次,并于第1次灌胃的同时,除正常对照组,各组腹腔注射D-Gal 200mg/kg。 于是末一次给药后12小时,断头处死动物,取血测定SGPT和胆红素,同时取肝脏进行病理组织检查。
2.2.3 小鼠碳粒廓清试验
昆明种小鼠40只,随机分为4组,每组10只,空白对照组予蒸馏水,药物组和可的松+药物组予叶下珠干浸膏25mg/kg.d,灌胃给药后15天。可的松组和可的松+药物组于13天起,以可的松100mg/kg.d,皮下注射。于最末一次给药后30min,尾静脉注射印度墨汁(1→稀释)0.1ml/10g,注射后1min及10min从眼后静脉丛取血40μl,置于2ml0.1Na2CO3溶液中摇匀,置721型分光光度计在波长680nm下测定光密度(OD),按下式计算廓清指数K。
K=(logOD1-logOD2)/(t2-t1)
式中OD1和OD2为1min和10min所取血样的光密度,t2-t1为取血时间差。